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Alvarado Santiago, Francis De Jesús - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.
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Purificación y caracterización bioquímica de la carboxipeptidasa (tcCP) de la semilla de Cacao (Theobroma Cacao L.).
Colegio de Postgraduados (COLPOS), 2011Co-Authors: Alvarado Santiago, Francis De JesúsAbstract:La carboxipeptidasa tcCP de semillas de Theobroma Cacao L., fue purificada 11.5 veces con un redimiendo de 45.5% con tres pasos de purificación que incluyen: homogenización y extracción de la fuente de enzima, precipitación con sulfato de amonio al 40% de saturación y cromatografía de intercambio iónico. El peso molecular de la enzima se estimo por electroforesis en gel de poliacrilamida al 12%, en condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE), con tinción con plata. La tcCP es un monómero con peso molecular de 30.77 kDa, el cual hidroliza péptidos a temperatura de 40-50ºC y pH 7.0. El sustrato Bz-Tyr-pNA fue hidrolizado a una mayor proporción a 10 mM (13.576 UAE/mg de proteína total) confirmando la presencia de actividad carboxipeptidasa (CP) (E.C. 3.4.16). En relación a los substratos Leucina-p-nitroanilida (Leu-pNA) y Lisina-p-nitroanilida (Lys-pNA) para detectar actividad de aminopeptidasa, Alanina-prolina-p-nitroanilida (Ala-pro-pNA) para detectar la actividad Xaa-Pro-DAP, en ambas concentraciones 1 y 10 mM, no se detectó actividad de las enzimas mencionadas con ninguno de los substratos ensayados. El sitio activo contiene una serina debido a que la actividad enzimática de la tcCP fue reducida 89.47 % por fenil metil sulfonil fluoruro (PMSF). Lo que indica que es una serina carboxipeptidasa. Sin embargo, la actividad de la tcCP es reducida por iones de mercurio, los que sugiere la presencia de un grupo sulfhidrilo adyacente al sitio activo de la enzima. El EDTA y 1,10-Fenantrolina inhibidores de metaloproteasas, no inactivaron la enzima. _______________ PURIFICATION AND BIOCHEMICAL CHARACTERIZATION OF CARBOXYPEPTIDASE (tcCP) OF THE COCOA SEEDS (Theobroma Cacao L.). ABSTRACT: Carboxypeptidase seeds tcCP from Theobroma Cacao L., was purified 11.5 fold with a 45.5% redeeming with three steps procedure including: homogenization and extraction of the enzyme source, ammonium sulfate precipitation and ion exchange chromatography. The molecular weight of the enzyme was estimated by polyacrylamide gel electrophoresis on 12% denaturing conditions (SDS-PAGE) with silver staining. The tcCP is a monomer with molecular weight of 30.77 kDa, which hydrolyzes peptides at temperature of 40-50 ° C and pH 7.0. The substrate Bz-Tyr-pNA was hydrolyzed to a greater share to 10 mM (13 576 UAE / mg of protein total) confirming the presence of carboxypeptidase activity (CP) (EC 4.3.16). In relation to the substrate leucine-p-nitroanilide (Leu-pNA) and Lys-p-nitroanilide (Lys-pNA) to detect aminopeptidase activity, alanine-proline-p-nitroanilide (Ala-Pro-pNA) to detect the activity Xaa-Pro-DAP, in both 1 and 10 mM concentrations, no activity was detected with the enzymes mentioned any of the substrates tested. The active site contains a serine because the enzymatic activity of the tcCP was reduced by 89.47% phenyl methyl sulfonyl fluoride (PMSF). Morever, the activity of the tcCP is reduced by mercury ions, which suggests the presence of a sulfhydryl group adjacent to the active site of the enzyme. EDTA and 1,10-phenanthroline inhibitors of metallo-carboxypeptidases, did not inactivate the enzyme
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Purificación y caracterización bioquímica de la carboxipeptidasa (tcCP) de la semilla de Cacao (Theobroma Cacao L.).
Colegio de Postgraduados (COLPOS), 2011Co-Authors: Alvarado Santiago, Francis De JesúsAbstract:La carboxipeptidasa tcCP de semillas de Theobroma Cacao L., fue purificada 11.5 veces con un redimiendo de 45.5% con tres pasos de purificación que incluyen: homogenización y extracción de la fuente de enzima, precipitación con sulfato de amonio al 40% de saturación y cromatografía de intercambio iónico. El peso molecular de la enzima se estimo por electroforesis en gel de poliacrilamida al 12%, en condiciones desnaturalizantes (SDS-PAGE), con tinción con plata. La tcCP es un monómero con peso molecular de 30.77 kDa, el cual hidroliza péptidos a temperatura de 40-50ºC y pH 7.0. El sustrato Bz-Tyr-pNA fue hidrolizado a una mayor proporción a 10 mM (13.576 UAE/mg de proteína total) confirmando la presencia de actividad carboxipeptidasa (CP) (E.C. 3.4.16). En relación a los substratos Leucina-p-nitroanilida (Leu-pNA) y Lisina-p-nitroanilida (Lys-pNA) para detectar actividad de aminopeptidasa, Alanina-prolina-p-nitroanilida (Ala-pro-pNA) para detectar la actividad Xaa-Pro-DAP, en ambas concentraciones 1 y 10 mM, no se detectó actividad de las enzimas mencionadas con ninguno de los substratos ensayados. El sitio activo contiene una serina debido a que la actividad enzimática de la tcCP fue reducida 89.47 % por fenil metil sulfonil fluoruro (PMSF). Lo que indica que es una serina carboxipeptidasa. Sin embargo, la actividad de la tcCP es reducida por iones de mercurio, los que sugiere la presencia de un grupo sulfhidrilo adyacente al sitio activo de la enzima. El EDTA y 1,10-Fenantrolina inhibidores de metaloproteasas, no inactivaron la enzima. _______________ PURIFICATION AND BIOCHEMICAL CHARACTERIZATION OF CARBOXYPEPTIDASE (tcCP) OF THE COCOA SEEDS (Theobroma Cacao L.). ABSTRACT: Carboxypeptidase seeds tcCP from Theobroma Cacao L., was purified 11.5 fold with a 45.5% redeeming with three steps procedure including: homogenization and extraction of the enzyme source, ammonium sulfate precipitation and ion exchange chromatography. The molecular weight of the enzyme was estimated by polyacrylamide gel electrophoresis on 12% denaturing conditions (SDS-PAGE) with silver staining. The tcCP is a monomer with molecular weight of 30.77 kDa, which hydrolyzes peptides at temperature of 40-50 ° C and pH 7.0. The substrate Bz-Tyr-pNA was hydrolyzed to a greater share to 10 mM (13 576 UAE / mg of protein total) confirming the presence of carboxypeptidase activity (CP) (EC 4.3.16). In relation to the substrate leucine-p-nitroanilide (Leu-pNA) and Lys-p-nitroanilide (Lys-pNA) to detect aminopeptidase activity, alanine-proline-p-nitroanilide (Ala-Pro-pNA) to detect the activity Xaa-Pro-DAP, in both 1 and 10 mM concentrations, no activity was detected with the enzymes mentioned any of the substrates tested. The active site contains a serine because the enzymatic activity of the tcCP was reduced by 89.47% phenyl methyl sulfonyl fluoride (PMSF). Morever, the activity of the tcCP is reduced by mercury ions, which suggests the presence of a sulfhydryl group adjacent to the active site of the enzyme. EDTA and 1,10-phenanthroline inhibitors of metallo-carboxypeptidases, did not inactivate the enzyme.Tesis (Maestría en Ciencias, especialista en Producción Agroalimentaria en el Trópico).- Colegio de Postgraduados, 2011.Consejo Nacional de Ciencia y Tecnología (CONACYT). Línea Prioritaria de Investigación No. 2. “Agroecosistemas Sustentables”
Palchizaca Pinguil, María Narcisa - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.
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Evaluación del efecto antiinflamatorio de Ilex guayusa (Loes), Vernonanthura patens (Kunth) y Theobroma Cacao (Linneo) en el modelo Animal Rata (Rattus norvegicus) de laboratorio.
'Escuela Superior Politecnica de Chimborazo', 2019Co-Authors: Palchizaca Pinguil, María NarcisaAbstract:El objetivo del presente trabajo de titulación fue comprobar la actividad antiinflamatoria de los extractos de las hojas de Ilex guayusa, Vernonanthura patens y Theobroma Cacao, aplicando dos dosis. Este trabajo se realizó en colaboración con Centro de Investigaciones Biotecnológicas del Ecuador, ESPOL. Se realizó control de calidad de la droga tipo fenólicos, flavonoides, alcaloides saponinas. El contenido de los fenoles totales, flavonoides y alcaloides se determinó a través de técnicas espectrofotométricas. La evolución del efecto antiinflamatorio se basó en el método de edema subplantar inducido por carragenina. La inflamación fue provocada por inducción de carragenina al 1%, bajo la aponeurosis plantar de la pata izquierda de la rata. Se emplearon 24 ratas, las mismas que fueron seleccionadas al azar y divididas en 8 grupos de 3 ratas. Se utilizó como control positivo (d iclofenaco sódico) y el control negativo (agua destilada), extractos de Ilex guayusa, Vernonanthura patens y Theobroma Cacao a concentración de 100 mg/kg y 300 mg/kg. La administración de los tratamientos fue por vía oral 30 minutos antes de la inducción de patología. Se midió el volumen de la pata y se calculó el porcentaje de inhibición de la inflamación mediante el programa de programa Microsoft Office Excel 2013. Para el análisis estadístico se aplicó test de univariables y DUNCAN. Los extractos de Ilex guayusa y Theobroma Cacao (300 mg/kg) presentaron mayor efecto antiinflamatorio en tiempo de 24 horas después de la inducción de la patología, y Vernonanthura patens (100 mg/kg) presentó menor porcentaje de inhibición, además, no existe diferencia significativa entre T. Cacao a 300 mg/kg y el control positivo. Se recomienda realizar estudios toxicológicos de las tres especies.The objective of the present titration work was to verify the anti-inflammatory activity of the extracts of the leaves of Ilex guayusa, Vernonanthura patens and Theobroma Cacao, applying two doses. This work was carried out in collaboration with the Center for Biotechnological Research of Ecuador, ESPOL. Control of the quality of the drug phenolic type, flavonoids, alkaloids saponins. The content of the total flavonoids and alkaloid phenols was determined by spectrophotometric techniques. The evolution of the anti-inflammatory effect was based on the method subplantar edema induced by carrageenan at 15, under the plantar aponeurosis of the left leg of the rat. Twenty-four rats were used, which were randomly selected and divided into 8 groups of 3 rats. It was used as a positive control (d iclofenac sodium) and negative control (distilled water), extracts of Ilex guayusa, Vernonanthura patens and Theobroma Cacao concentration of 100 mg/kg and 300 mg/kg. The administration of the treatments was orally 30 minutes before the induction of the pathology. The paw volume was measured and the inhibition percentage of inflammation was calculated by means of the program program Microsoft office Excel 2013. For the statistical analysis, the univariate and DUNCAN test were applied. The extracts of Ilex guayusa and Theobroma Cacao (300 mg/kg) had a greater anti-inflammatory effect in 24 hours after the induction of the pathology, and Vernonanthura patens (100 mg/kg) presented a lower percentage of inhibition, there is no difference significant difference between T. Cacao at 300 mg /kg and the positive control. It is recommended to carry out toxicological studies of the three species
Valverde Zumba, Lissethy Del Pilar - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.
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Evaluación de la actividad antiinflamatoria de extractos acuosos combinados de Ilex guayusa (Loes), Vernonanthura patens (Kunth) y Theobroma Cacao (Linneo) en modelo animal Rata (Rattus norvegicus).
'Escuela Superior Politecnica de Chimborazo', 2019Co-Authors: Valverde Zumba, Lissethy Del PilarAbstract:El presente trabajo de investigación tuvo como objetivo evaluar la actividad antiinflamatoria de extractos acuosos combinados de Ilex guayusa, Vernonanthura patens y Theobroma Cacao para lo cual se utilizó ratas (Rattus norvegicus) en las cuales se indujo un edema en la aponeurosis subplantar de la pata izquierda con el uso de carragenina al 1% en solución salina 0,9%. Se utilizaron 21 ratas, hembras y machos distribuidos en 7 grupos; dos hembras y un macho en cada uno con un peso comprendido entre 160-210 g. Se evaluó la actividad de 4 combinaciones de extractos: La combinación 1 (Ilex guayusa, Vernonanthura patens y Theobroma Cacao) fue evaluada en dos dosis (100 mg/kg y 300 mg/kg). Las restantes combinaciones: Combinación 2 (Ilex guayusa y Vernonanthura patens); Combinación 3 (Ilex guayusa y Theobroma Cacao) y Combinación 4 (Vernonanthura patens y Theobroma Cacao), fueron evaluadas en una dosis de 200 mg/kg. Se usó como vehículo agua destilada y control positivo diclofenaco sódico (150 mg/kg). Se realizaron 7 mediciones desde 30 minutos antes de la inducción de la inflamación hasta 24 horas después. Previamente se realizó la cuantificación de compuestos fenólicos, flavonoides y alcaloides totales. Los resultados de la actividad antiinflamatoria, expresados como diámetro de inflamación, fueron analizados estadísticamente mediante una prueba ANOVA unifactorial y un test de Tukey. Se concluyó que las combinaciones poseían distintos efectos, siendo la combinación 1 la más efectiva, esto se pudo evidenciar al analizar los porcentajes de inflamación 24 horas después de inducida la patología. La combinación 1 en dosis 100 mg/kg casi igualó el efecto del diclofenaco sódico pero la dosis de 300 mg/kg lo superó. Las combinaciones 2,3 y 4 tuvieron un porcentaje menor. Por esta razón se recomienda evaluar la actividad de la combinación 1 a dosis inferiores a 100 mg/kg y superiores a 300 mg/kg.This research work aimed at evaluating anti-inflammatory activity of combined aqueous extracts of Ilex guayusa, Vernonanthura patens, and Theobroma Cacao for which rats were used (Rattus norvegicus) in which edema in the plantar aponeurosis on the left foot was induced with the use of carrageenan at 1% in saline solution at 0,9%. Twenty-one rats were tested, male and female split into seven groups; two females and a male within each group weighing between 160-210 g. It was tested the activity of four combined extracts. Combination 1 (Ilex guayusa, Vernonanthura patens, and Theobroma Cacao) was assessed in two doses (100mg/kg and 300 mg/kg). The remaining combinations: Combination 2 (Ilex guayusa, Vernonanthura patens); Combination 3 (Ilex guayusa and Theobroma Cacao) and Combination 4 (Vernonanthura patens and Theobroma Cacao) were assessed in a dose of 200 mg/kg. Distilled water and positive control diclofenac sodium (150 mg/kg). Seven measurements were carried out from 30 minutes before the carrageenan-induced inflammation to 24 hours later. The quantification of phenolic compounds, flavonoids, and total alkaloids was previously carried out. The results of the anti-inflammatory activity expressed as the diameter of inflammation were statistically analyzed through a one-way ANOVA and Tukey's test. It was concluded that the combinations had different effects, being Combination 1 the most effective, this was witnessed analyzing the percentages of inflammation 24 hours after induced the pathology. Combination 1 in doses 100 mg/kg almost equaled the diclofenac sodium effect but the dose of 300 mg/kg exceeded it. Combinations 2, 3 and 4 had a minor percentage. For this reason, it is recommended to assess Combination 1 activity at lower doses to 100 mg/kg and higher doses to 300 mg/kg
Saut, Anugerah Manalu - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.
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PENGARUH KOMPOS TANDAN KOSONG KELAPA SAWIT (TKKS) DAN PLANT GROWTH PROMOTING RHIZOBACTERIA (PGPR) TERHADAP PERTUMBUHAN BIBIT KAKAO (Theobroma Cacao L).
2021Co-Authors: Saut, Anugerah ManaluAbstract:Penelitian tentang pengaruh kompos tandan kosong kelapa sawit (TKKS) dan plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) terhadap pertumbuhan bibit kakao (Theobroma Cacao L.) telah dilakukan di lahan percobaan Kampus III Unand Dharmasraya pada bulan November 2019 sampai April 2020. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan pengaruh interaksi antara kompos TKKS dan PGPR serta mendapatkan takaran terbaik kedua bahan tersebut terhadap pertumbuhan bibit kakao (Theobroma Cacao L.) Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) faktorial yang terdiri atas dua faktor dengan empat taraf perlakuan. Faktor pertama adalah kompos tandan kosong kelapa sawit (0 g/polybag, 150 g/polybag, 300 g/polybag dan 450 g/polybag) dan faktor kedua adalah plant growth promoting rhizobacteria (0 ml/polybag, 50 ml/polybag, 100 ml/polybag dan 150 ml/polybag). Variabel yang diamati dalam penelitian ini adalah pertambahan tinggi tanaman, diameter batang, jumlah daun dan ratio tajuk akar. Hasil penelitian menunjukan bahwa tidak adanya pengaruh interaksi pemberian kompos TKKS dan plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) terhadap pertumbuhan bibit kakao. Akan tetapi pemberian kompos TKKS memberikan pengaruh terhadap pertambahan tinggi tanaman, diameter batang dan jumlah daun kemudian pemberian plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) tidak memberikan pengaruh terhadap semua variabel pertumbuhan bibit kakao. Kata kunci: Bibit kakao, Kompos Tandan Kosong Kelapa Sawit (TKKS), Plant Growth Promoting Rhizobacteria (PGPR
Simamora, Amir Franky - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.
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PEMANFAATAN KOMPOS TANDAN KOSONG KELAPA SAWIT (TKKS) DENGAN BAKTERI SELULOLITIK DAN LIGOLITIK SERTA NPK TERHADAP PERTUMBUHAN BIBIT KAKAO (Theobroma Cacao L.)
'Tanjungpura University', 2019Co-Authors: Dini, Isna Rahma, Idwar Idwar, Simamora, Amir FrankyAbstract:Cocoa (Theobroma Cacao L.) is one of the large plantations after oil palm. The increase in cocoa nursery can be accompanied by the utilization of waste derived from palm oil, namely oil palm empty fruit bunches (OPEFB). OPEFB can be useful as organic fertilizer because it can improve soil physical, chemical and biological properties. The use of OPEFB as organic fertilizer will also reduce excessive use of NPK. Utilization of OPEFB into organic fertilizer can be in the form of compost or raw OPEFB organic matter plus cellulolytic and lignolytic microbes. This study aims to determine the effect of NPK fertilizer and OPEFB compost on the growth of cocoa seedlings. This research was conducted experimentally using a completely randomized design (CRD) consisting of 9 treatments and 3 replications. Parameters of observation were plant height, stem diameter, number of leaves, root canopy ratio, dry weight of seedlings and age of planting. The results showed that the provision of 100 g/polybag OPEFB compost plus 50% NPK fertilizer (2 g / polybag) could provide good growth in cocoa seeds (Theobroma Cacao L.).Keyword : Cocoa, compost, cellulolytic bacteria, lignolytic bacteria, OPEF
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PEMANFAATAN KOMPOS TANDAN KOSONG KELAPA SAWIT DENGAN BAKTERI SELULOLITIK DAN LIGOLITIK SERTA NPK TERHADAP PERTUMBUHAN BIBIT KAKAO (Theobroma Cacao L.)
'Fakultas Pertanian Universitas Sultan Ageng Tirtayasa', 2019Co-Authors: Dini, Isna Rahma, Idwar Idwar, Simamora, Amir FrankyAbstract:ABSTRACTCocoa (Theobroma Cacao L.) is one of the large plantations after oil palm. Theincrease in cocoa nursery can be accompanied by the utilization of waste derivedfrom palm oil, namely oil palm empty fruit bunches (OPEFB). oil palm emptyfruit bunches can be useful as organic fertilizer because it can improve soilphysical, chemical and biological properties. The use of OPEFB as organic fertilizer will also reduce excessive use of NPK. Utilization of OPEFB into organic fertilizer can be in the form of compost or raw OPEFB organic matter plus cellulolytic and lignolytic microbes. This study aims to determine the effectof NPK fertilizer and OPEFB compost on the growth of cocoa seedlings. Thisresearch was conducted experimentally using a completely randomized designconsisting of nine treatments and three replications. Parameters of observationwere plant height, stem diameter, number of leaves, root canopy ratio, dry weight of seedlings and age of planting. The results showed that the provision of 100 g polybag-1 OPEFB compost plus 50% NPK fertilizer (2 g polybag-1) could provide good growth in cocoa seeds (Theobroma Cacao L.)