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Luciano Moura De Mello - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • uso de floema para a obtencao de dna total de erythrina Crista galli l fabaceae
    Anais do Salão Internacional de Ensino Pesquisa e Extensão, 2017
    Co-Authors: Alcemir Da Silva Marques, Vanessa Goncalves Da Rosa, Luciano Moura De Mello, Rafael Pla Matielo Lemos, Valdir Marcos Stefenon, Michele Goulart Dos Santos
    Abstract:

    A Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE) e uma especie arborea nativa do sul do Brasil, tipica de ambientes umidos, sendo encontrada naturalmente tambem no Uruguai e parte do territorio argentino, paraguaio e boliviano. Tendo habitos caducifolios, as acoes de isolamento de DNA, a partir de folhas, dependendo da estacao do ano, pode tornar-se um limitante para os trabalhos envolvendo a ecologia molecular da especie. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo para extracao de DNA total a partir do caule de E. Crista-galli. As amostras de floema de E. Crista-galli foram obtidas de uma planta adulta, crescendo no municipio de Sao Gabriel, Rio Grande do Sul. A partir de uma das amostras obtidas foi realizado o isolamento do DNA pelo protocolo CTAB. As outras foram mantidas, duas a temperatura ambiente e duas em refrigerador por 28 dias a fim de verificar o efeito do sistema e do tempo de armazenamento do floema como fonte de material genetico. Os resultados de concentracao de DNA total e qualidade dos isolados foram avaliados por espectrofotometria utilizando o equipamento Nanoview®, sendo sua qualidade tambem verificada por eletroforese em gel de agarose 0,8%. Isolados obtidos a partir de floema apresentaram de forma geral, independente do sistema de armazenamento e do tempo testado, boas relacoes entre as absorbâncias 230, 260 e 280nm. Os testes realizados apos 28 dias apos a coleta revelaram uma reducao na concentracao de DNA mas as relacoes de qualidade das amostras mantiveram-se relativamente dentro dos valores ideais. Floema de E. Crista-galli apresenta um bom material para o isolamento de DNA total, dispensando o uso de 2-β-mercaptoetanol para reduzir a contaminacao por polifenois das amostras como ocorre em folhas. A metodologia de coleta e de armazenamento possibilita isolados promissores como fonte de material genetico nos periodos nas quais as plantas a serem amostradas encontrarem-se sem folhas, requerendo, no entanto ajustes que permitam melhorar a qualidade dos isolados.

  • efeito da concentracao de 2 b mercaptoetanol na extracao de dna de erythrina Crista galli l
    13ª Mostra de Iniciação Científica, 2016
    Co-Authors: Vanessa Goncalves Da Rosa, Alcemir Da Silva Marques, Michele Goulart Dos Santos, Luciano Moura De Mello, Rafael Pla Matielo Lemos, Valdir Marcos Stefenon
    Abstract:

    A Erythrina Crista-galli L., conhecida como corticeira-do-banhado, e uma especie arborea de porte medio, caracteristica do bioma Pampa. O interesse por seu cultivo baseia-se na sua utilizacao ornamental e seu potencial para recuperacao de ecossistemas de solos alagadicos, inclusive em areas de baixas temperaturas. Estudos mostram que o isolamento de DNA total a partir de folhas e câmbio vascular em E. Crista-galli indicaram contaminacao por polissacarideos e polifenois, o que reduz a qualidade do DNA isolado. O 2-β-mercaptoetanol e um reagente antioxidante usado para neutralizar acao desses contaminantes. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo testar diferentes concentracoes de 2-β-mercaptoetanol para extracao de DNA de Erythrina Crista-galli , verificando seu efeito na quantidade e qualidade de DNA isolado. Para esse trabalho foram utilizadas 6 (seis) sementes de E. Crista-galli , coletadas no municipio de Livramento-RS e transportadas para a Universidade Federal do Pampa - Campus Sao Gabriel, onde foram cultivadas ex vitro ate que as plântulas atingissem cerca de 20 cm de altura. Apos, uma plântula com aproximadamente 200 mg de cobertura foliar foi selecionada e dividida em 5 (cinco) testes, sendo o controle com kit de extracao de DNA (DNeasy Plant Mini Kit) da marca Qiagen seguindo o protocolo do fabricante. Esse kit foi utilizado como controle por se valer de filtros fisicos e quimicos para remocao das impurezas do DNA. Para as demais amostras, a extracao de DNA foi realizada com protocolo CTAB 2% (“Cationic hexadecyl trimethyl ammonium bromide”) com adicao de diferentes concentracoes de 2-β-mercaptoetanol (0%, 1%, 3% e 5%). O DNA extraido foi quantificado por espectrofotometria utilizando o equipamento Nanoview® e sua qualidade foi verificada por eletroforese em gel de agarose 0,8%. Dentre os protocolos testados para extracao de DNA, observou-se atraves de espectrofotometria, que ao utilizar o protocolo controle (kit Qiagen) e o CTAB 2% (concentracao de 3% de 2-β-mercaptoetanol) obteve-se as maiores quantidades de DNA de E. Crista-galli , com o total de 37 ng e 47 ng, respectivamente, evidenciando alta concentracao de DNA em gel de agarose. Quanto aos protocolos compostos por CTAB 2%, pode-se inferir que a concentracao de 2-β-mercaptoetanol tem influencia direta na quantidade de DNA obtida. Isso porque, os protocolos que utilizaram concentracoes maiores ou menores que 3% desse reagente obtiveram quantidades inferiores a 22 ng de DNA. Assim, conclui-se que o protocolo de extracao de DNA que obtem melhor qualidade e maiores quantidades DNA de E. Crista-galli L. e o CTAB 2% com concentracao de 3% de 2-β-mercaptoetanol, sendo inclusive, superior ao protocolo controle (kit Qiagen). Este trabalho servira de base para futuras pesquisas em genetica de populacoes de Erythrina Crista-galli L.

  • superacao de dormencia e influencia da temperatura substrato e fotoperiodo na germinacao de sementes de erythrina Crista galli l fabaceae
    Revista Thema, 2016
    Co-Authors: Luciano Moura De Mello, Alexandra Alves Cantos, Geri Eduardo Meneghello, Ana Carolina Silveira Da Silva, Francisco Amaral Villela
    Abstract:

    Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE) e uma arvore nativa do Brasil, Uruguai, Paraguai, Bolivia e Argentina. As Regras de Analises de Sementes - RAS nao possuem orientacoes para a realizacao de testes de germinacao para a especie. O objetivo deste trabalho foi testar o desempenho de tratamentos para a superacao de dormencia das sementes e recomendar condicoes adequadas de substrato, temperatura e fotoperiodo para a realizacao de testes de germinacao. O tratamento indicado para a superacao da dormencia foi a escarificacao mecânica e a temperatura otima para os testes de germinacao de 30oC constantes. Nao houve diferenca entre tratamentos em relacao aos substratos testados nem quanto aos fotoperiodos indicando-se assim o substrato entre papel e com 8h de luz por sua praticidade e economia.  Superacao de dormencia e influencia da temperatura, substrato e fotoperiodo na germinacao de sementes de Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE)

  • isolamento de dna genomico a partir de folhas e câmbio congelados de erythrina Crista galli l fabaceae corticeira do banhado
    Revista Thema, 2016
    Co-Authors: Luciano Moura De Mello, L R S Reiniger, Geri Eduardo Meneghello, Francisco Amaral Villela, Monalize Salete Mota
    Abstract:

    Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE) e uma arvore nativa do Brasil, Uruguai, Paraguai, leste da Bolivia e Argentina. Ocorre em ambientes umido e florestas de galerias, podendo ser utilizada na arborizacao e na restauracao de ambientes naturais. Nao foram encontradas na literatura metodologias para o isolamento de DNA genomico da especie utilizando folhas ou câmbio congelados. O objetivo do trabalho foi testar dois protocolos de isolamento de DNA e duas fontes de material genetico, avaliando concentracao e qualidade dos isolados. Folhas frescas congeladas e câmbio nao constituem boa fonte de material genetico segundo as metodologias utilizadas. Novos testes sao necessarios no sentido de otimizar os procedimentos de coleta e isolamento, buscando solucionar os problemas de contaminacoes por polissacarideos e polifenois e da baixa concentracao do DNA genomico isolado nas amostras.

  • isolamento de dna genomico utilizando sementes de erythrina Crista galli l corticeira do banhado e schizolobium parahyba vell blake guapuruvu
    Revista Thema, 2015
    Co-Authors: Luciano Moura De Mello, Leonardo Severo Da Costa, Caetano Miguel Lemos Serrote, L R S Reiniger
    Abstract:

    A Corticeira-do-banhado e uma especie nativa do sul do Brasil com grande potencial na arborizacao urbana. Esforcos com o isolamento de DNA genomico a partir de folhas e câmbio vascular em E. Crista-galli indicaram contaminacao por possissacarideos ou polifenois. O Guapuruvu e nativo da Floresta Atlântica e o DNA isolado de folhas ja foram utilizadas com sucesso na avaliacao da diversidade genetica. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um novo e mais rapido protocolo para o isolamento de DNA utilizando sementes destas especies. O protocolo proposto apresentou melhores resultados qualiquantitativos em relacao as fontes anteriormente avaliadas para E. Crista-galli e o tempo medio da execucao da tecnica mostrou-se significativamente menor.

Francisco Amaral Villela - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • superacao de dormencia e influencia da temperatura substrato e fotoperiodo na germinacao de sementes de erythrina Crista galli l fabaceae
    Revista Thema, 2016
    Co-Authors: Luciano Moura De Mello, Alexandra Alves Cantos, Geri Eduardo Meneghello, Ana Carolina Silveira Da Silva, Francisco Amaral Villela
    Abstract:

    Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE) e uma arvore nativa do Brasil, Uruguai, Paraguai, Bolivia e Argentina. As Regras de Analises de Sementes - RAS nao possuem orientacoes para a realizacao de testes de germinacao para a especie. O objetivo deste trabalho foi testar o desempenho de tratamentos para a superacao de dormencia das sementes e recomendar condicoes adequadas de substrato, temperatura e fotoperiodo para a realizacao de testes de germinacao. O tratamento indicado para a superacao da dormencia foi a escarificacao mecânica e a temperatura otima para os testes de germinacao de 30oC constantes. Nao houve diferenca entre tratamentos em relacao aos substratos testados nem quanto aos fotoperiodos indicando-se assim o substrato entre papel e com 8h de luz por sua praticidade e economia.  Superacao de dormencia e influencia da temperatura, substrato e fotoperiodo na germinacao de sementes de Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE)

  • isolamento de dna genomico a partir de folhas e câmbio congelados de erythrina Crista galli l fabaceae corticeira do banhado
    Revista Thema, 2016
    Co-Authors: Luciano Moura De Mello, L R S Reiniger, Geri Eduardo Meneghello, Francisco Amaral Villela, Monalize Salete Mota
    Abstract:

    Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE) e uma arvore nativa do Brasil, Uruguai, Paraguai, leste da Bolivia e Argentina. Ocorre em ambientes umido e florestas de galerias, podendo ser utilizada na arborizacao e na restauracao de ambientes naturais. Nao foram encontradas na literatura metodologias para o isolamento de DNA genomico da especie utilizando folhas ou câmbio congelados. O objetivo do trabalho foi testar dois protocolos de isolamento de DNA e duas fontes de material genetico, avaliando concentracao e qualidade dos isolados. Folhas frescas congeladas e câmbio nao constituem boa fonte de material genetico segundo as metodologias utilizadas. Novos testes sao necessarios no sentido de otimizar os procedimentos de coleta e isolamento, buscando solucionar os problemas de contaminacoes por polissacarideos e polifenois e da baixa concentracao do DNA genomico isolado nas amostras.

  • isolamento de dna genomico a partir de folhas secas de erythrina Crista galli l fabaceae corticeira do banhado
    Revista Thema, 2015
    Co-Authors: Luciano Moura De Mello, L R S Reiniger, Geri Eduardo Meneghello, Francisco Amaral Villela, Monalize Salete Mota
    Abstract:

    Erythrina Crista-galli L. (FABACEAE) e uma arvore nativa do Brasil, Uruguai, Paraguai, leste da Bolivia e Argentina, podendo ser utilizada na arborizacao e na restauracao de ambientes naturais. Nao foram encontradas na literatura metodologias para o isolamento de DNA genomico da especie. O objetivo do trabalho foi testar tres protocolos de isolamento de DNA aplicadas a folhas secas a temperatura ambiente verificando a quantidade e qualidade de DNA isolado. Folhas secas mostraram constituir boa fonte de material genetico para as avaliacoes geneticas da especie estudada, entretanto, novos testes sao necessarios no sentido de otimizar os protocolos e solucionar as contaminacoes por polissacarideos e polifenois nas amostras.

Xing Zhang - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • bioassay guided isolation of potent aphicidal erythrina alkaloids against aphis gossypii from the seed of erythrina Crista galli l
    Pest Management Science, 2018
    Co-Authors: Delong Wang, Shandong Yi, Hui Jiang, Juntao Feng, Xing Zhang
    Abstract:

    BACKGROUND Cotton aphid (Aphis gossypii Glover) is one of the most invasive pests to cotton. Many botanical phytochemicals have a long history as a source of insecticides, and templates for new insecticides. This study was undertaken to isolate aphicidal compounds from the seeds of Erythrina Crista-galli L. following the bioassay-guided isolation method. RESULTS Three novel and eleven known Erythrina alkaloids were isolated. Compounds erysodine (9), erysovine (10), erysotrine (8) and erythraline (11) showed moderate to excellent aphicidal activity with LD50 of 7.48, 6.68, 5.13 and 4.67 ng/aphid, respectively. The Potter spray tower bioassay showed their LC50 with 186.81, 165.35, 163.74 and 112.78 μg/mL, respectively. The unique substructure, which presents an sp3 methylene at C-8, a non-oxygenated site at N-9 and a conjugate dienes group (Δ1,2 and Δ6,7), plays a crucial role in the aphicidal activity. Erythraline (11) led to different degree of increase in SOD, CAT and GST activities. CONCLUSION The present study demonstrated that Erythrina alkaloids erysodine (9), erysovine (10), erysotrine (8) and erythraline (11) possess the potential to be used as botanical aphicides for commercial application or as new templates for the development of new insecticides.

  • Bioassay‐guided isolation of potent aphicidal Erythrina alkaloids against Aphis gossypii from the seed of Erythrina Crista‐galli L
    Pest Management Science, 2017
    Co-Authors: Delong Wang, Shandong Yi, Hui Jiang, Juntao Feng, Zhi-qing Ma, Xing Zhang
    Abstract:

    BACKGROUND Cotton aphid (Aphis gossypii Glover) is one of the most invasive pests to cotton. Many botanical phytochemicals have a long history as a source of insecticides, and templates for new insecticides. This study was undertaken to isolate aphicidal compounds from the seeds of Erythrina Crista-galli L. following the bioassay-guided isolation method. RESULTS Three novel and eleven known Erythrina alkaloids were isolated. Compounds erysodine (9), erysovine (10), erysotrine (8) and erythraline (11) showed moderate to excellent aphicidal activity with LD50 of 7.48, 6.68, 5.13 and 4.67 ng/aphid, respectively. The Potter spray tower bioassay showed their LC50 with 186.81, 165.35, 163.74 and 112.78 μg/mL, respectively. The unique substructure, which presents an sp3 methylene at C-8, a non-oxygenated site at N-9 and a conjugate dienes group (Δ1,2 and Δ6,7), plays a crucial role in the aphicidal activity. Erythraline (11) led to different degree of increase in SOD, CAT and GST activities. CONCLUSION The present study demonstrated that Erythrina alkaloids erysodine (9), erysovine (10), erysotrine (8) and erythraline (11) possess the potential to be used as botanical aphicides for commercial application or as new templates for the development of new insecticides.

Meinhart H Zenk - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • biosynthesis of erythrina alkaloids in erythrina Crista galli
    Phytochemistry, 1999
    Co-Authors: Ulrich H Maier, Wolfgang Rodl, Brigitte Deusneumann, Meinhart H Zenk
    Abstract:

    A precursor application system was developed to allow the study of Erythrina alkaloid formation in Erythrina Crista-galli. Fruit wall tissue of this species was recognized as the major site of alkaloid biosynthesis. The application of radioactively and 13C-labelled potential precursors showed that the hitherto assumed precursor (S)-norprotosinomenine was not incorporated into the Erythrina alkaloids. In contrast, (S)-coclaurine as well as (S)-norreticuline were metabolized to erythraline and erythrinine, respectively, suggesting that a coclaurine-norreticuline pathway is operative in Erythrina alkaloid formation. Feeding of [1-13C]-labelled (S)-norreticuline with subsequent NMR spectroscopy demonstrated that the resulting erythraline was exclusively labelled at position C-10. Therefore, the participation of a symmetrical intermediate of the diphenoquinone type in Erythrina alkaloid biosynthesis can be excluded.

Qijian Chen - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.