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Rosadio A. Raúl - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • IgG serum concentrations in alpacas neonates killed by Enterotoxemia
    'Universidad Nacional Mayor de San Marcos Vicerectorado de Investigacion', 2018
    Co-Authors: Maximiliano G. Jorge, Maturrano H. Lenin, Castillo D. Hugo, Guzmán M. Karol, Pérez J. David, Luna E. Luis, Puray C. Nidia, Rosadio A. Raúl
    Abstract:

    El presente estudio tuvo como objetivo determinar los niveles de Inmunoglobulina G (IgG) sérica en alpacas neonatas (5-23 días de edad) muertas por Enterotoxemia y en animales de edades similares, pero clínicamente sanos. En una primera fase se estableció una curva estándar de degradación fisiológica de la IgG sérica a partir de sueros sanguíneos de seis neonatos aparentemente sanos a partir del día 2 y hasta los 21 días de edad (n=9). En una segunda fase se determinaron las concentraciones de IgG sérica en 17 alpacas neonatas muertas con lesiones compatibles con Enterotoxemia y en 26 animales, de edades similares, aparentemente sanos. Las concentraciones de IgG, determinadas por la prueba de Inmunodifusión Radial, evidenciaron que todas las crías a las 48 horas del nacimiento presentaron concentraciones adecuadas de IgG, mientras que solo tres de los animales muertos por Enterotoxemia tenían niveles de IgG por debajo de la curva estándar de degradación, aunque solo una de ellas con niveles inferiores a 900 mg/dl a los 14 días, lo que podría ser considerado como falla parcial de transferencia pasiva. Las concentraciones de IgG sérica de los 26 animales clínicamente normales (2893 mg/dl) y aquellas obtenidas de animales muertos por Enterotoxemia (2361 mg/dl) fueron estadísticamente similares. El análisis de riesgo mediante la prueba de Odds Ratio (OR: 5.35; IC= 0.50-57.22) indicó que no existe asociación entre niveles adecuados de IgG y la mortalidad por Enterotoxemia en alpacas neonatas.The objective of the present study was to determine the levels of serum immunoglobulin G (IgG) in neonatal alpacas (5-23 days of age) killed by Enterotoxemia and in animals of similar ages, but clinically healthy. In a first phase, a standard curve of physiological degradation of serum IgG was established from blood sera of six apparently healthy neonates from day 2 to 21 days of age (n=9). In a second phase, serum IgG concentrations were determined in 17 dead neonatal alpacas with lesions compatible with Enterotoxemia and in 26 animals of similar ages, apparently healthy. The concentrations of IgG, determined by the Radial Immunodiffusion test, showed that all the animals at 48 hours of birth had adequate concentrations of IgG, while only three of the animals killed by Enterotoxemia had IgG levels below the obtained standard curve, although only one of them with levels below 900 mg/dl at 14 days, which could be considered as a partial passive transfer failure. The serum IgG concentrations of the 26 clinically normal animals (2893 mg/dl) and those obtained from animals killed by Enterotoxemia (2361 mg/dl) were statistically similar. The risk analysis using the Odds Ratio test (OR: 5.35, CI = 0.50-57.22) indicated that there is no association between adequate levels of IgG and mortality from Enterotoxemia in neonatal alpacas

  • In vitro and in vivo analysis of Clostridium perfringens supernatant isolates from alpaca Enterotoxemia cases.
    Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Medicina Veterinaria., 2013
    Co-Authors: Pérez J. David, Castillo D. Hugo, Luna E. Luis, Rosadio A. Raúl, Véliz A. Álvaro, Londoñe B. Pablo, Llanco A. Luis, Carhuallanqui P Iván, Piazza F. Roxane, Maturrano H. Lenin
    Abstract:

    PEREZ J., David, LLANCO A., Luis, CASTILLO D., Hugo [et al.]. Análisis in vitro e in vivo de sobrenadantes crudos de Clostridium perfringens aislados de casos de Enterotoxemia en alpacas. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú [en línea]. 2012, vol. 23, no. 3, p. 336-349. ISSN 1682-3419.Se reportan evaluaciones de sobrenadantes bacterianos (nativos) crudos obtenidos de 24 aislados de C. perfringens de casos fatales de Enterotoxemia buscando caracterizar propiedades lecitinasas, hemolíticas, citotóxicas in vitro y enterotóxicas in vivo de la exotoxina fosfolipasa C (Cp-PLC). Los aislados (12 en estados vegetativos y 12 esporulados) contenían el gen cpa (genotipo A), y seis de ellos tenían además el gen cpb2, pero todos carecían del gen de la enterotoxina (cpe). Las actividades lecitinasas fueron evaluadas, en microplacas, usando emulsiones de yemas de huevo; las hemolíticas y perfringolisina en microplacas, usando eritrocitos de carnero y de equino respectivamente; las citotóxicas, en células HEp-2; y las enterotóxicas en conejos inoculados intraintestinalmente. Los aislados fueron clasificados, de acuerdo a los niveles de la actividad lecitinasa, en cepas de alta, mediana y baja producción de Cp-PLC. La mayoría de aislados (66.6%) en estados vegetativos mostraron perfiles de alta y mediana producción de Cp-PLC, mientras que la totalidad de los esporulados fueron de baja producción. Todos los aislados altamente productores de Cp-PLC fueron citotóxicos y mostraron las mayores actividades hemolíticas (24.0 ± 8.4 u.a.h). A pesar de que el 66.6% (n=16) de los aislados indujeron acumulación de fluido intestinal (0.12-0.47 mL/cm), ninguno fue capaz de generar lesiones intestinales en conejos, similares a las descritas en la Enterotoxemia. Los sobrenadantes crudos de los aislados evidenciaron la presencia de otras toxinas tipo hemolisinas, citotoxinas y enterotoxinas, distintas a Cp-PLC, CPE y toxina â2, que necesitan ser investigadas a fin de elucidar su posible rol en la etiopatogénesis de la Enterotoxemia en alpacas

  • Protective effect of a Clostridium polyvalent vaccine on neonatal mortality in alpacas.
    Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Medicina Veterinaria., 2013
    Co-Authors: Rosadio A. Raúl, Véliz A. Álvaro, Yaya L. Katherine, Quispe Teodoro
    Abstract:

    ROSADIO A., Raúl, YAYA L., Katherine, VELIZ A., Álvaro [et al.]. Efecto protector de una vacuna polivalente anticlostridial sobre la mortalidad neonatal en alpacas. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú [en línea]. 2012, vol. 23, no. 3, p. 299-306. ISSN 1682-3419.El estudio analiza el efecto beneficioso de una vacuna multivalente a base de componentes bacterianos y toxinas inactivadas (anacultivo) en la prevención de la Enterotoxemia en alpacas. La vacuna múltiple, conteniendo mayoritariamente (60%) cepas de Clostridium perfringens tipos A y Aβ2, fue introducida en el año 2001 en una unidad de producción alpaquera en el distrito de Ñuñoa (Melgar, Puno) y utilizada durante seis años consecutivos. El efecto de la vacuna fue analizado comparando las tasas de mortalidad neonatal total y específica por Enterotoxemia en el año 2000 con las mortalidades presentadas durante los seis años de vacunación (2001-2006). El estudio contempló vacunar a todas las hembras preñadas y a todas las crías en el primer año (2001) y solamente a las crías en los años siguientes; sin embargo, en el 2003 se vacunó solamente a las madres gestantes. La mortalidad se calculó en base a los reportes administrativos mensuales de mortalidad de crías preparados por el personal sanitario y veterinario responsable de la unidad de producción. Los diagnósticos causales de muertes fueron basados por observaciones de campo y en algunos casos confirmados por análisis de laboratorio. La introducción de la vacuna redujo la mortalidad total de 37.4% (año 2000, sin vacuna) a 25.2, 23.7, 9.4, 12.1, 15.1 y 14.3% en los años 2001 a 2006, y la mortalidad neonatal debido a Enterotoxemia de 19.5% (año 2000, sin vacuna) a 7.2, 9.1, 1.0, 0.3, 2.1 y 3.9% para los años 2001 a 2006. El anacultivo (bacteria y exotoxinas inactivadas) polivalente redujo significativamente las tasas de mortalidad neonatal general y específica debido a Enterotoxemia

  • Neonatal enteric complex in andean alpacas.
    Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Medicina Veterinaria., 2013
    Co-Authors: Rosadio A. Raúl, Maturrano H. Lenin, Pérez J. David, Luna E. Luis
    Abstract:

    ROSADIO A. Raúl, MATURRANO H., Lenin, PÉREZ J., David [et al.]. El complejo entérico neonatal en alpacas andinas. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú [en línea]. 2012, vol. 23, no. 3, p. 261-271. ISSN 1682-3419.Se revisan avances de investigaciones sobre los principales agentes causales de morbilidad y mortalidad en alpacas neonatales asociadas a procesos entéricos en el sur peruano. Análisis microbiológicos confirman al Clostridium perfringens tipo A como el agente prevalente en fatalidades asociadas con Enterotoxemia e identifican por primera vez la presencia del gen secundario β2. El análisis in vitro argumenta la existencia de cepas con tres perfiles en la actividad fosfolipídica (alta, mediana y baja), mostrando que las cepas de medianas y altas producciones fueron capaces de producir lesiones intestinales en conejos pero incapaces de producir similares lesiones en crías de alpacas. Estudios histopatológicos revelan la coexistencia de Clostridium y E. macusaniensis en lesiones de enteritis hemorrágica en muestras intestinales de crías muertas por Enterotoxemia, sugiriendo a las infecciones coccidiales como posibles agentes desencadenantes de fatalidades conocidas como Enterotoxemia. Por otro lado, estudios realizados en hisopados clínicos o contenidos intestinales han identificado molecularmente cepas de E. coli patogénicas (enteropatogénicas y enterohemorrágicas). Adicionalmente, en casos clínicos de diarreas neonatales, mediante inmunofluorescencia directa y PCR, se ha detectado Giardia intestinalis coexistiendo con cepas de E. coli enteropatogénicas, así como un coronavirus similar al virus bovino. Estos patógenos son potenciales causantes de procesos diarreicos en animales incluyendo a poblaciones humanas

  • Advances on pathogenesis and prevention of Enterotoxemia of alpacas
    Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2012
    Co-Authors: Rosadio A. Raúl, Maturrano H. Lenin, Castillo D. Hugo, Pérez J. David, Luna E. Luis, Véliz A. Álvaro, Yaya L. Katherine, Londoñe B. Pablo
    Abstract:

    Se revisan las investigaciones recientes realizadas por nuestro grupo de investigadores sobre Enterotoxemia de las alpacas en el Perú. Estudios microbiológicos y moleculares demostraron que la mayoría de las cepas aisladas fueron de Clostridium perfringens y estas contienen únicamente el gen cpa de la toxina α (C. perfringens genotipo A) y solamente el 0.4% tienen genes cpa y cpb de las toxinas α y β (genotipo C). En análisis paralelo, se encontró que el 8.5% de los genotipos A contenían, adicionalmente, el gen cpb2, pero ninguna cepa tenía el gen cpe de la enterotoxina. Estos resultados evidencian que las exotoxinas secretadas, y no las endotoxinas (cpe), serían los probables factores de virulencia clostridiales en la Enterotoxemia de la alpaca. Adicionalmente, en el análisis histopatológico de intestinos infectados, el 30.6% de las muestras presentó abundantes estructuras parasitarias inmaduras correspondientes a Eimeria macusaniensis, afectando la mucosa y epitelio de las glándulas crípticas intestinales, sugiriendo a las infecciones coccidiales como uno de los posibles factores desencadenantes o predisponentes de la Enterotoxemia. Estos resultados microbiológicos permitieron diseñar, preparar y mejorar una vacuna convencional inactivada que contiene, mayoritariamente, componentes bacterianos y exotoxinas A, Aβ2 y C aislados de casos fatales de la enfermedad. Desde su introducción en una empresa alpaquera del sur peruano en 2001, la vacuna ha logrado reducir progresivamente los índices de mortalidad por Enterotoxemia de 19.5% (2000, sin vacuna) hasta alcanzar tasas menores al 5% en 2006.The results of our recent research work on Enterotoxemia in Peruvian alpacas are presented. Microbiological and molecular analyses found that the majority of the isolates corresponded to Clostridium perfringens and contained the cpa coding gene for α toxin (A genotype) while 0.4% contained both the cpa and cpb genes of the α and β toxins (C genotype). A parallel study revealed that 8.5% of the genotype A isolates also had cpb2, but the cpe (enterotoxin) gene was absent in all cases. These results highly suggest that the exotoxins secreted by C. perfringens are the virulent factors in Enterotoxemia, rather than the endogenous enterotoxin. Additionally, an histopathological study of intestinal samples from fatal cases showed that 30.6% had abundant immature structures of Eimeria macusaniensis affecting deep mucosa and cryptic gland epithelia, primarily in the jejune and ileum, suggesting that eimeriosis is likely a triggering or predisposing factor for the development of Enterotoxemia. The microbiological studies allowed the design and progressive improvement of an inactivated Enterotoxemia vaccine containing primarily the bacterial component plus exotoxins of types A, Aβ2 and C isolated from natural fatal cases of the disease. During six years of field tests in southern Peru, the vaccine has steadily reduced specific neonatal mortality rates due to Enterotoxemia from 19.5% (2000, without vaccine) to less than 5% in 2006

Francisco A Uzal - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • cardiopulmonary lesions in sheep produced by experimental acute clostridium perfringens type d Enterotoxemia
    Veterinary Pathology, 2021
    Co-Authors: Federico Giannitti, Julian I Rood, Juliann Beingesser, Jorge P Garcia, Vicki Adams, Joaquin I Armendano, Francisco A Uzal
    Abstract:

    Enterotoxemia caused by Clostridium perfringens type D is one of the most prevalent clostridial diseases of sheep. The lesions of the acute form of this disease, particularly the cerebral lesions, are well characterized; however, detailed descriptions of the cardiac and pulmonary lesions are lacking. Here we describe cardiopulmonary lesions in experimental acute type D Enterotoxemia in sheep and determine the role of epsilon toxin (ETX) in the development of these lesions. Four groups of 6 sheep were intraduodenally inoculated with either a wild-type C. perfringens type D strain; its etx knockout mutant, which is unable to produce ETX; the etx mutant complemented with the wild-type etx gene, which regains the ETX toxigenic ability; or sterile culture medium as a control. All sheep were subjected to postmortem examination within 24 hours of inoculation. Lesion scores were compared between groups for pulmonary edema; hydrothorax; ascites; hydropericardium; endocardial, myocardial and epicardial hemorrhages; microscopic lesions of acute myocardial degeneration and necrosis; and myocardial, endocardial, and epicardial edema, hemorrhage, and inflammation. Only sheep inoculated with the wild-type and complemented ETX-toxigenic bacterial strains developed cardiopulmonary lesions, which were present in varying degrees of severity and proportions. These lesions were not present in sheep inoculated with the etx mutant or in the negative control. We conclude that severe acute cardiopulmonary lesions in sheep with experimental Enterotoxemia are associated with the capacity of the strains to produce ETX. These changes are likely contributors to the clinical signs and even death of affected animals.

  • potential therapeutic effects of mepacrine against clostridium perfringens enterotoxin in a mouse model of Enterotoxemia
    Infection and Immunity, 2019
    Co-Authors: Mauricio A Navarro, Bruce A Mcclane, John C Freedman, Archana Shrestha, Juliann Beingesser, Francisco A Uzal
    Abstract:

    Clostridium perfringens enterotoxin (CPE) is a pore-forming toxin that causes the symptoms of common bacterial food poisoning and several non-foodborne human gastrointestinal diseases, including antibiotic-associated diarrhea and sporadic diarrhea. In some cases, CPE-mediated disease can be very severe or fatal due to the involvement of Enterotoxemia. Therefore, the development of potential therapeutics against CPE action during Enterotoxemia is warranted. Mepacrine, an acridine derivative drug with broad-spectrum effects on pores and channels in mammalian membranes, has been used to treat protozoal intestinal infections in human patients. A previous study showed that the presence of mepacrine inhibits CPE-induced pore formation and activity in enterocyte-like Caco-2 cells, reducing the cytotoxicity caused by this toxin in vitro Whether mepacrine is similarly protective against CPE action in vivo has not been tested. When the current study evaluated whether mepacrine protects against CPE-induced death and intestinal damage using a murine ligated intestinal loop model, mepacrine protected mice from the enterotoxemic lethality caused by CPE. This protection was accompanied by a reduction in the severity of intestinal lesions induced by the toxin. Mepacrine did not reduce CPE pore formation in the intestine but inhibited absorption of the toxin into the blood of some mice. Protection from enterotoxemic death correlated with the ability of this drug to reduce CPE-induced hyperpotassemia. These in vivo findings, coupled with previous in vitro studies, support mepacrine as a potential therapeutic against CPE-mediated enterotoxemic disease.

  • Supplemental Material, DS1_VET_10.11770300985818817071 - Intramural Vascular Edema in the Brain of Goats With Clostridium perfringens Type D Enterotoxemia
    2019
    Co-Authors: Joaquín Ortega, José Manuel Verdes, Eleonora L. Morrell, John W. Finnie, Jim Manavis, Francisco A Uzal
    Abstract:

    Supplemental Material, DS1_VET_10.11770300985818817071 for Intramural Vascular Edema in the Brain of Goats With Clostridium perfringens Type D Enterotoxemia by Joaquín Ortega, José Manuel Verdes, Eleonora L. Morrell, John W. Finnie, Jim Manavis, and Francisco A. Uzal in Veterinary Pathology

  • enterotoxic clostridia clostridium perfringens enteric diseases
    Microbiology spectrum, 2018
    Co-Authors: Archana Shrestha, Francisco A Uzal, Bruce A Mcclane
    Abstract:

    In humans and livestock, Clostridium perfringens is an important cause of intestinal infections that manifest as enteritis, enterocolitis, or Enterotoxemia. This virulence is largely related to the toxin-producing ability of C. perfringens. This article primarily focuses on the C. perfringens type F strains that cause a very common type of human food poisoning and many cases of nonfoodborne human gastrointestinal diseases. The enteric virulence of type F strains is dependent on their ability to produce C. perfringens enterotoxin (CPE). CPE has a unique amino acid sequence but belongs structurally to the aerolysin pore-forming toxin family. The action of CPE begins with binding of the toxin to claudin receptors, followed by oligomerization of the bound toxin into a prepore on the host membrane surface. Each CPE molecule in the prepore then extends a beta-hairpin to form, collectively, a beta-barrel membrane pore that kills cells by increasing calcium influx. The cpe gene is typically encoded on the chromosome of type F food poisoning strains but is encoded by conjugative plasmids in nonfoodborne human gastrointestinal disease type F strains. During disease, CPE is produced when C. perfringens sporulates in the intestines. Beyond type F strains, C. perfringens type C strains producing beta-toxin and type A strains producing a toxin named CPILE or BEC have been associated with human intestinal infections. C. perfringens is also an important cause of enteritis, enterocolitis, and Enterotoxemia in livestock and poultry due to intestinal growth and toxin production.

  • mechanisms of action and cell death associated with clostridium perfringens toxins
    Toxins, 2018
    Co-Authors: Mauricio A Navarro, Bruce A Mcclane, Francisco A Uzal
    Abstract:

    Clostridium perfringens uses its large arsenal of protein toxins to produce histotoxic, neurologic and intestinal infections in humans and animals. The major toxins involved in diseases are alpha (CPA), beta (CPB), epsilon (ETX), iota (ITX), enterotoxin (CPE), and necrotic B-like (NetB) toxins. CPA is the main virulence factor involved in gas gangrene in humans, whereas its role in animal diseases is limited and controversial. CPB is responsible for necrotizing enteritis and Enterotoxemia, mostly in neonatal individuals of many animal species, including humans. ETX is the main toxin involved in Enterotoxemia of sheep and goats. ITX has been implicated in cases of enteritis in rabbits and other animal species; however, its specific role in causing disease has not been proved. CPE is responsible for human food-poisoning and non-foodborne C. perfringens-mediated diarrhea. NetB is the cause of necrotic enteritis in chickens. In most cases, host–toxin interaction starts on the plasma membrane of target cells via specific receptors, resulting in the activation of intracellular pathways with a variety of effects, commonly including cell death. In general, the molecular mechanisms of cell death associated with C. perfringens toxins involve features of apoptosis, necrosis and/or necroptosis.

Yaya L. Katherine - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • Protective effect of a Clostridium polyvalent vaccine on neonatal mortality in alpacas.
    Universidad Nacional Mayor de San Marcos Facultad de Medicina Veterinaria., 2013
    Co-Authors: Rosadio A. Raúl, Véliz A. Álvaro, Yaya L. Katherine, Quispe Teodoro
    Abstract:

    ROSADIO A., Raúl, YAYA L., Katherine, VELIZ A., Álvaro [et al.]. Efecto protector de una vacuna polivalente anticlostridial sobre la mortalidad neonatal en alpacas. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú [en línea]. 2012, vol. 23, no. 3, p. 299-306. ISSN 1682-3419.El estudio analiza el efecto beneficioso de una vacuna multivalente a base de componentes bacterianos y toxinas inactivadas (anacultivo) en la prevención de la Enterotoxemia en alpacas. La vacuna múltiple, conteniendo mayoritariamente (60%) cepas de Clostridium perfringens tipos A y Aβ2, fue introducida en el año 2001 en una unidad de producción alpaquera en el distrito de Ñuñoa (Melgar, Puno) y utilizada durante seis años consecutivos. El efecto de la vacuna fue analizado comparando las tasas de mortalidad neonatal total y específica por Enterotoxemia en el año 2000 con las mortalidades presentadas durante los seis años de vacunación (2001-2006). El estudio contempló vacunar a todas las hembras preñadas y a todas las crías en el primer año (2001) y solamente a las crías en los años siguientes; sin embargo, en el 2003 se vacunó solamente a las madres gestantes. La mortalidad se calculó en base a los reportes administrativos mensuales de mortalidad de crías preparados por el personal sanitario y veterinario responsable de la unidad de producción. Los diagnósticos causales de muertes fueron basados por observaciones de campo y en algunos casos confirmados por análisis de laboratorio. La introducción de la vacuna redujo la mortalidad total de 37.4% (año 2000, sin vacuna) a 25.2, 23.7, 9.4, 12.1, 15.1 y 14.3% en los años 2001 a 2006, y la mortalidad neonatal debido a Enterotoxemia de 19.5% (año 2000, sin vacuna) a 7.2, 9.1, 1.0, 0.3, 2.1 y 3.9% para los años 2001 a 2006. El anacultivo (bacteria y exotoxinas inactivadas) polivalente redujo significativamente las tasas de mortalidad neonatal general y específica debido a Enterotoxemia

  • Advances on pathogenesis and prevention of Enterotoxemia of alpacas
    Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2012
    Co-Authors: Rosadio A. Raúl, Maturrano H. Lenin, Castillo D. Hugo, Pérez J. David, Luna E. Luis, Véliz A. Álvaro, Yaya L. Katherine, Londoñe B. Pablo
    Abstract:

    Se revisan las investigaciones recientes realizadas por nuestro grupo de investigadores sobre Enterotoxemia de las alpacas en el Perú. Estudios microbiológicos y moleculares demostraron que la mayoría de las cepas aisladas fueron de Clostridium perfringens y estas contienen únicamente el gen cpa de la toxina α (C. perfringens genotipo A) y solamente el 0.4% tienen genes cpa y cpb de las toxinas α y β (genotipo C). En análisis paralelo, se encontró que el 8.5% de los genotipos A contenían, adicionalmente, el gen cpb2, pero ninguna cepa tenía el gen cpe de la enterotoxina. Estos resultados evidencian que las exotoxinas secretadas, y no las endotoxinas (cpe), serían los probables factores de virulencia clostridiales en la Enterotoxemia de la alpaca. Adicionalmente, en el análisis histopatológico de intestinos infectados, el 30.6% de las muestras presentó abundantes estructuras parasitarias inmaduras correspondientes a Eimeria macusaniensis, afectando la mucosa y epitelio de las glándulas crípticas intestinales, sugiriendo a las infecciones coccidiales como uno de los posibles factores desencadenantes o predisponentes de la Enterotoxemia. Estos resultados microbiológicos permitieron diseñar, preparar y mejorar una vacuna convencional inactivada que contiene, mayoritariamente, componentes bacterianos y exotoxinas A, Aβ2 y C aislados de casos fatales de la enfermedad. Desde su introducción en una empresa alpaquera del sur peruano en 2001, la vacuna ha logrado reducir progresivamente los índices de mortalidad por Enterotoxemia de 19.5% (2000, sin vacuna) hasta alcanzar tasas menores al 5% en 2006.The results of our recent research work on Enterotoxemia in Peruvian alpacas are presented. Microbiological and molecular analyses found that the majority of the isolates corresponded to Clostridium perfringens and contained the cpa coding gene for α toxin (A genotype) while 0.4% contained both the cpa and cpb genes of the α and β toxins (C genotype). A parallel study revealed that 8.5% of the genotype A isolates also had cpb2, but the cpe (enterotoxin) gene was absent in all cases. These results highly suggest that the exotoxins secreted by C. perfringens are the virulent factors in Enterotoxemia, rather than the endogenous enterotoxin. Additionally, an histopathological study of intestinal samples from fatal cases showed that 30.6% had abundant immature structures of Eimeria macusaniensis affecting deep mucosa and cryptic gland epithelia, primarily in the jejune and ileum, suggesting that eimeriosis is likely a triggering or predisposing factor for the development of Enterotoxemia. The microbiological studies allowed the design and progressive improvement of an inactivated Enterotoxemia vaccine containing primarily the bacterial component plus exotoxins of types A, Aβ2 and C isolated from natural fatal cases of the disease. During six years of field tests in southern Peru, the vaccine has steadily reduced specific neonatal mortality rates due to Enterotoxemia from 19.5% (2000, without vaccine) to less than 5% in 2006

  • ENSAYO DE TRES PROGRAMAS DE VACUNACIÓN ANTICLOSTRIDIAL EN ALPACAS
    Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2012
    Co-Authors: Yaya L. Katherine, Rosadio A. Raúl
    Abstract:

    La Enterotoxemia es la enfermedad infecciosa más importante que afecta las crías de las alpacas. El control está supeditado a la aplicación de medidas preventivas de manejo y a la aplicación de inmunoprofilaxis. En el presente trabajo se ensayaron tres programas de vacunación anticlostridial durante tres campañas de parición (2001, 2002 y 2003) en una unidad de producción de una empresa de propiedad social en Puno. Se empleó un anacultivo a base de cepas de Clostridium perfringens, predominantemente de origen ovino (cepas A, B, C y D) y de una cepa tipo A aislada de alpaca. El efecto de la vacuna se realizó comparando tasas de mortalidad total y mortalidad asociada a Enterotoxemia ocurrida antes de la introducción de la vacuna (año 2000). En el primer programa (año 2001) se administró dos dosis de la vacuna a todas las madres gestantes (n=2,952) y una dosis a todas las crías. En el segundo programa (año 2002) se vacunó con una dosis a todas las crías (n=2,647), y en el tercer programa (año 2003) se vacunó con una dosis a todas las madres gestantes (n=2,760). La aplicación de la vacuna redujo la mortalidad neonatal total de 33.4 (año 2000) a 25.2 j año2001), 23.7 (año 2002) y a9.4%(&0 2003). La vacuna, igualmente, redujo la mortalidad neonatal asociadas a Enterotoxemia desde 19.5 (año 2000) hasta 7.2,9.1 y l.O%para los mismos años. Se concluye que el anacultivo (vacuna) fue efectivo para el control de Enterotoxemia en alpacas, independientemente del tipo de programa aplicado. Sin embargo, la reducción fue más evidente en los programas que consideraron la vacunación de madres gestantes

  • AVANCES EN EL ESTUDIO DE LA PATOGÉNESIS Y PREVENCIÓN DE LA Enterotoxemia DE LAS ALPACAS.
    'Universidad Nacional Mayor de San Marcos Vicerectorado de Investigacion', 2012
    Co-Authors: Rosadio A. Raúl, Maturrano H. Lenin, Castillo D. Hugo, Pérez J. David, Luna E. Luis, Véliz A. Álvaro, Yaya L. Katherine, Londoñe B. Pablo
    Abstract:

    The results of our recent research work on Enterotoxemia in Peruvian alpacas are presented. Microbiological and molecular analyses found that the majority of the isolates corresponded to Clostridium perfringens and contained the cpa coding gene for α toxin (A genotype) while 0.4% contained both the cpa and cpb genes of the α and β toxins (C genotype). A parallel study revealed that 8.5% of the genotype A isolates also had cpb2, but the cpe (enterotoxin) gene was absent in all cases. These results highly suggest that the exotoxins secreted by C. perfringens are the virulent factors in Enterotoxemia, rather than the endogenous enterotoxin. Additionally, an histopathological study of intestinal samples from fatal cases showed that 30.6% had abundant immature structures of Eimeria macusaniensis affecting deep mucosa and cryptic gland epithelia, primarily in the jejune and ileum, suggesting that eimeriosis is likely a triggering or predisposing factor for the development of Enterotoxemia. The microbiological studies allowed the design and progressive improvement of an inactivated Enterotoxemia vaccine containing primarily the bacterial component plus exotoxins of types A, Aβ2 and C isolated from natural fatal cases of the disease. During six years of field tests in southern Peru, the vaccine has steadily reduced specific neonatal mortality rates due to Enterotoxemia from 19.5% (2000, without vaccine) to less than 5% in 2006.Se revisan las investigaciones recientes realizadas por nuestro grupo de investigadores sobre Enterotoxemia de las alpacas en el Perú. Estudios microbiológicos y moleculares demostraron que la mayoría de las cepas aisladas fueron de Clostridium perfringens y estas contienen únicamente el gen cpa de la toxina α (C. perfringens genotipo A) y solamente el 0.4% tienen genes cpa y cpb de las toxinas α y β (genotipo C). En análisis paralelo, se encontró que el 8.5% de los genotipos A contenían, adicionalmente, el gen cpb2, pero ninguna cepa tenía el gen cpe de la enterotoxina. Estos resultados evidencian que las exotoxinas secretadas, y no las endotoxinas (cpe), serían los probables factores de virulencia clostridiales en la Enterotoxemia de la alpaca. Adicionalmente, en el análisis histopatológico de intestinos infectados, el 30.6% de las muestras presentó abundantes estructuras parasitarias inmaduras correspondientes a Eimeria macusaniensis, afectando la mucosa y epitelio de las glándulas crípticas intestinales, sugiriendo a las infecciones coccidiales como uno de los posibles factores desencadenantes o predisponentes de la Enterotoxemia. Estos resultados microbiológicos permitieron diseñar, preparar y mejorar una vacuna convencional inactivada que contiene, mayoritariamente, componentes bacterianos y exotoxinas A, Aβ2 y C aislados de casos fatales de la enfermedad. Desde su introducción en una empresa alpaquera del sur peruano en 2001, la vacuna ha logrado reducir progresivamente los índices de mortalidad por Enterotoxemia de 19.5% (2000, sin vacuna) hasta alcanzar tasas menores al 5% en 2006

  • Protective effect of a clostridium polyvalent vaccine on neonatal mortality in alpacas
    'Universidad Nacional Mayor de San Marcos Vicerectorado de Investigacion', 2012
    Co-Authors: Rosadio A. Raúl, Véliz A. Álvaro, Yaya L. Katherine, Quispe Teodoro
    Abstract:

    El estudio analiza el efecto beneficioso de una vacuna multivalente a base de componentes bacterianos y toxinas inactivadas (anacultivo) en la prevención de la Enterotoxemia en alpacas. La vacuna múltiple, conteniendo mayoritariamente (60%) cepas de Clostridium perfringens tipos A y Aβ2, fue introducida en el año 2001 en una unidad de producción alpaquera en el distrito de Ñuñoa (Melgar, Puno) y utilizada durante seis años consecutivos. El efecto de la vacuna fue analizado comparando las tasas de mortalidad neonatal total y específica por Enterotoxemia en el año 2000 con las mortalidades presentadas durante los seis años de vacunación (2001-2006). El estudio contempló vacunar a todas las hembras preñadas y a todas las crías en el primer año (2001) y solamente a las crías en los años siguientes; sin embargo, en el 2003 se vacunó solamente a las madres gestantes. La mortalidad se calculó en base a los reportes administrativos mensuales de mortalidad de crías preparados por el personal sanitario y veterinario responsable de la unidad de producción. Los diagnósticos causales de muertes fueron basados por observaciones de campo y en algunos casos confirmados por análisis de laboratorio. La introducción de la vacuna redujo la mortalidad total de 37.4% (año 2000, sin vacuna) a 25.2, 23.7, 9.4, 12.1, 15.1 y 14.3% en los años 2001 a 2006, y la mortalidad neonatal debido a Enterotoxemia de 19.5% (año 2000, sin vacuna) a 7.2, 9.1, 1.0, 0.3, 2.1 y 3.9% para los años 2001 a 2006. El anacultivo (bacteria y exotoxinas inactivadas) polivalente redujo significativamente las tasas de mortalidad neonatal general y específica debido a Enterotoxemia.This paper analyse the beneficial effect of a multivalent vaccine in reducing mortality rates due to Enterotoxemia in alpaca crias. The programme was implemented in 2001 and ran for six consecutive years (2001-2006) in a cooperative farm in southern Peru (Nuñoa, Puno) using a multiple anaculture (bacterine and toxoid) containing predominantly (60%) two subtypes of Clostridium perfringens (A and Aβ2). During these six years, different vaccination protocols were used including inoculating both mothers and crias in the first year and either mothers (2003) or only crias (2002, 2004-2006). The impact of the vaccination was evaluated by comparing total and specific neonatal mortality rates due to Enterotoxemia relative to the same rates recorded for the year prior to initiation of the programme (2000). A reduction in total neonatal mortality was recorded from 33.4% in 2000 with no vaccination, to 25.2, 23.7, 9.4, 12.1, 15.1, and 14.3% in years 2001 to 2006. The vaccine equally reduced the mortality associated with Enterotoxemia from 19.5% (2000) to 7.2, 9.1, 1.0, 0.3, 2.1, and 3.9% for 2001 through 2006. The polyvalent anaculture (bacterine and toxoid) significantly reduced total mortality rate as well as neonatal mortality rate due to Enterotoxemia

Pérez Janampa, David Remy - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • Caracterización toxigénica de la fosfolipasa C del Clostridium perfringens (Cp-PLC) y su relación con aislados de C. perfrigens de casos de Enterotoxemia en alpacas
    'Universidad Nacional Mayor de San Marcos Vicerectorado de Investigacion', 2013
    Co-Authors: Pérez Janampa, David Remy
    Abstract:

    --- Enterotoxemia caused by Clostridium perfringens, causes a mortality neonatal rate up to 70%, this is why it is considered as the most important infections disease. Recent studies has suggested that Cp-PLC (Clostridium perfringens phospholipase C) is a main virulence factor responsible of the enterotoxemic lesions found in alpacas and other domestic animals. This study evaluated the toxigenic characteristics of Cp-PLC and of supercultures of C. perfringens isolates from Enterotoxemia in alpacas associated with their levels of Cp-PLC production. The Cp-PLC purification protocol used was successful, showing that Cp-PLC as an enterotoxin enteric unable to cause injury. Similarly, C. perfringens isolates analyzed showed different toxigenic characteristics independently of the Cp-PLC production. Apparently, Cp-PLC does not be a essential factor from C. perfringens in the production of enteric lesions in cases of Enterotoxemia in alpacas. Key Word: Cp-PLC, Clostridium perfringens, enterotoxigenic.TesisLa Enterotoxemia, causada por el Clostridium perfringens, es la enfermedad infecciosa más importante que afecta a las alpacas, debido a que ocasiona elevadas tasas de mortalidad neonatal de hasta 70%. Recientes estudios han sugerido la participación de la Cp-PLC (C. perfringens fosfolipasa C) como factor de virulencia responsable del cuadro enterotoxemico en alpacas y otras especies domesticas. El presente estudio evaluó las características toxigénicas de la Cp-PLC y de sobrenadantes de diferentes aislados de C. perfringens obtenidos de casos de Enterotoxemia en alpacas relacionándolos con sus niveles de producción de Cp-PLC. El protocolo de purificación de Cp-PLC mostró ser exitoso, mostrando su comportamiento como una enterotoxina incapaz de generar lesiones entéricas. Asimismo, los aislados de C. perfringens analizados evidenciaron distintas características toxigénicas independientes de la presencia de Cp-PLC. Al parecer, la Cp-PLC no seria un factor esencial del C. perfringens en la producción de lesiones entéricas en casos de Enterotoxemias en alpacas. Palabras Claves: Cp-PLC, Clostridium perfringens, enterotoxigenic

  • Genotipificación y subtipificación de Clostridium perfringens aislados de crías de alpacas muertas por Enterotoxemia
    'Universidad Nacional Mayor de San Marcos Vicerectorado de Investigacion', 2013
    Co-Authors: Pérez Janampa, David Remy
    Abstract:

    --- Enterotoxemia, caused by the Clostridium perfringens, is the most important infectious disease which affects alpacas, causing up to 70% neonatal mortality. In spite of this, little information exists on the virulence factors (toxins) of C. perfringens which play an important role in the etiopathogenesis of the disease. The objective of the present study was to determine the genotype of C. perfringens isolated from cases of Enterotoxemia based on the presence of genes (cpa, cpb, etx and iap) which encode the main toxins (α, β, ε and ι), as well as the subtypes based on the presence of genes cpe and cpb2 which encode the enterotoxin (CPE) and β2-toxin respectively. A total of 47 isolations of C. perfringens were obtained from the small intestine of neonatal alpaca mortalities which had both clinical signs and gross and histological injuries typical of Enterotoxemia. The DNA was extracted from these isolates and analyzed by PCR Multiplex using specific primers for the toxin genes. The cpa gene genotype A subtype cpe-cpb2-) was the only gene found in 70.2% (33/47) of the isolations. In 27.7% (13/47) of the cases the cpa and cpb2 (genotype A subtype cpe-cpb2+) genes were found and in 2.1% (1/47) the cpa, cpb and cpe (genotype C subtype cpe+cpb2-) genes were present. These results demonstrate the primary role of α-toxin, as well as the presence of β2 and β-toxins in the etiopathogenesis of Enterotoxemia in alpacas. Key Words: Clostridium perfringens, genotypification, Enterotoxemia, alpacas.TesisLa Enterotoxemia, causada por el Clostridium perfringens, es la enfermedad infecciosa más importante que afecta a las alpacas, debido a que ocasiona elevadas tasas de mortalidad neonatal de hasta 70%. A pesar de esto, existe poca información sobre los factores de virulencia (toxinas) del C. perfringens que participan en la etiopatogénesis de la enfermedad. El presente estudio tuvo como objetivo determinar el genotipo de los C. perfringens aislados de casos de Enterotoxemia en base a la presencia de los genes (cpa, cpb, etx e iap) codificantes de las toxinas principales (α, β, ε y ι) así como el subtipo en base a la presencia de los genes cpe y cpb2 codificantes de la enterotoxina (CPE) y la toxina β2, respectivamente. En el estudio se analizaron 47 aislamientos de C. perfringens obtenidos de intestino de crías muertas de alpaca con signos clínicos y lesiones anatomopatológicas e histopatológicas correspondientes a Enterotoxemia. El ADN de estos aislados fue extraído y analizado por la técnica de PCR Múltiple conteniendo iniciadores específicos para los genes codificantes de las toxinas mencionadas, encontrándose en 33/47 (70.2%) aislamientos sólo al gen cpa (genotipo A subtipo cpe-cpb2-), en 13/47 (27.7%) a los genes cpa y cpb2 (genotipo A subtipo cpe-cpb2+) y en 1/47 (2.1%) a los genes cpa, cpb y cpe ( genotipo A subtipo cpe+cpb2-). Estos resultados evidencian principalmente a la toxina α, así como a la β2 y β participar en la etiopatogénesis de la Enterotoxemia en las alpacas. Palabras Clave: Clostridium perfringens, genotipificación, Enterotoxemia, alpacas

  • Caracterización toxigénica de la fosfolipasa C del Clostridium perfringens (Cp-PLC) y su relación con aislados de C. perfrigens de casos de Enterotoxemia en alpacas
    'Universidad Nacional Mayor de San Marcos Vicerectorado de Investigacion', 2010
    Co-Authors: Pérez Janampa, David Remy
    Abstract:

    La Enterotoxemia, causada por el Clostridium perfringens, es la enfermedad infecciosa más importante que afecta a las alpacas, debido a que ocasiona elevadas tasas de mortalidad neonatal de hasta 70%. Recientes estudios han sugerido la participación de la Cp-PLC (C. perfringens fosfolipasa C) como factor de virulencia responsable del cuadro enterotoxemico en alpacas y otras especies domesticas. El presente estudio evaluó las características toxigénicas de la Cp-PLC y de sobrenadantes de diferentes aislados de C. perfringens obtenidos de casos de Enterotoxemia en alpacas relacionándolos con sus niveles de producción de Cp-PLC. El protocolo de purificación de Cp-PLC mostró ser exitoso, mostrando su comportamiento como una enterotoxina incapaz de generar lesiones entéricas. Asimismo, los aislados de C. perfringens analizados evidenciaron distintas características toxigénicas independientes de la presencia de Cp-PLC. Al parecer, la Cp-PLC no seria un factor esencial del C. perfringens en la producción de lesiones entéricas en casos de Enterotoxemias en alpacas.Fondo Nacional de Desarrollo Científico y Tecnológico - Fondecy

  • Caracterización toxigénica de la fosfolipasa C del Clostridium perfringens (Cp-PLC) y su relación con aislados de C. perfrigens de casos de Enterotoxemia en alpacas
    Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2010
    Co-Authors: Pérez Janampa, David Remy
    Abstract:

    La Enterotoxemia, causada por el Clostridium perfringens, es la enfermedad infecciosa más importante que afecta a las alpacas, debido a que ocasiona elevadas tasas de mortalidad neonatal de hasta 70%. Recientes estudios han sugerido la participación de la Cp-PLC (C. perfringens fosfolipasa C) como factor de virulencia responsable del cuadro enterotoxemico en alpacas y otras especies domesticas. El presente estudio evaluó las características toxigénicas de la Cp-PLC y de sobrenadantes de diferentes aislados de C. perfringens obtenidos de casos de Enterotoxemia en alpacas relacionándolos con sus niveles de producción de Cp-PLC. El protocolo de purificación de Cp-PLC mostró ser exitoso, mostrando su comportamiento como una enterotoxina incapaz de generar lesiones entéricas. Asimismo, los aislados de C. perfringens analizados evidenciaron distintas características toxigénicas independientes de la presencia de Cp-PLC. Al parecer, la Cp-PLC no seria un factor esencial del C. perfringens en la producción de lesiones entéricas en casos de Enterotoxemias en alpacas. Palabras clave: Cp-PLC, Clostridium perfringens, enterotoxigenico

Pezo Alencastre, Sergio Enrique - One of the best experts on this subject based on the ideXlab platform.

  • Influencia de la Administración de un Anacultivo a Partir del Agente Etiológico de la Enterotoxemia en Crías de Alpacas (Vicugna Pacos), Sobre la Producción de IgG Específica en el Centro Experimental la Raya - Cusco 2017
    'Universidad Catolica de Santa Maria', 2018
    Co-Authors: Pezo Alencastre, Sergio Enrique
    Abstract:

    TesisEl presente trabajo, tiene como objetivo Determinar la Influencia de la administración de un anacultivo a partir del agente etiológico de la Enterotoxemia en alpacas, sobre la producción de IgG (inmunoglobulina G) específica en crías de alpaca inoculadas con el anacultivo a los 5 días y ver si existe un aumento de IgG a los 10 días de edad. Para este trabajo, se obtuvo muestras de intestino delgado de crías de alpacas muertas a causa de Enterotoxemia, se sembró el contenido del intestino delgado en agar cerebro corazón y agar yema de huevo para el desarrollo de colonias de Clostridium perfringens para ser utilizadas en la preparación del anacultivo. Este anacultivo está hecho a base de caldo tioglicolato para el cual uso 40.5gr en 1000ml de agua destilada, una vez reconocida la bacteria de Clostridium perfringens se le coloca la bacteria al caldo tioglicolato, se esperó 24 horas y se le agregó formol al 0.1% (2.4ml para 400ml) para inactivar al Clostridium perfringens. Se inoculo el anacultivo al grupo control de 10 crías de alpaca con 5 días de edad y se midió los niveles de IgG mediante la prueba de inmunodifusión radial obteniendo una media de 812.169 IgG/DL y el grupo testigo 720.724 IgG/DL a los 5 días; luego de la administración del anacultivo al grupo control, la concentración de IgG/DL aumento a 1308.946 IgG/DL y el grupo testigo obtuvo una concentración de 452.113 IgG/DL 10 días después, lo cual con la prueba estadística de T muestra que el grupo control es significativo valor p=0.002 (p

  • Influencia de la Administración de un Anacultivo a Partir del Agente Etiológico de la Enterotoxemia en Crías de Alpacas (Vicugna Pacos), Sobre la Producción de IgG Específica en el Centro Experimental la Raya - Cusco 2017
    'Universidad Catolica de Santa Maria', 2018
    Co-Authors: Pezo Alencastre, Sergio Enrique
    Abstract:

    El presente trabajo, tiene como objetivo Determinar la Influencia de la administración de un anacultivo a partir del agente etiológico de la Enterotoxemia en alpacas, sobre la producción de IgG (inmunoglobulina G) específica en crías de alpaca inoculadas con el anacultivo a los 5 días y ver si existe un aumento de IgG a los 10 días de edad. Para este trabajo, se obtuvo muestras de intestino delgado de crías de alpacas muertas a causa de Enterotoxemia, se sembró el contenido del intestino delgado en agar cerebro corazón y agar yema de huevo para el desarrollo de colonias de Clostridium perfringens para ser utilizadas en la preparación del anacultivo. Este anacultivo está hecho a base de caldo tioglicolato para el cual uso 40.5gr en 1000ml de agua destilada, una vez reconocida la bacteria de Clostridium perfringens se le coloca la bacteria al caldo tioglicolato, se esperó 24 horas y se le agregó formol al 0.1% (2.4ml para 400ml) para inactivar al Clostridium perfringens. Se inoculo el anacultivo al grupo control de 10 crías de alpaca con 5 días de edad y se midió los niveles de IgG mediante la prueba de inmunodifusión radial obteniendo una media de 812.169 IgG/DL y el grupo testigo 720.724 IgG/DL a los 5 días; luego de la administración del anacultivo al grupo control, la concentración de IgG/DL aumento a 1308.946 IgG/DL y el grupo testigo obtuvo una concentración de 452.113 IgG/DL 10 días después, lo cual con la prueba estadística de T muestra que el grupo control es significativo valor p=0.002 (p